文献类型：期刊文章

作　　者：魏峰[1,2,3] 马爱群[1,2,3] 王亭忠[1,2,3] 张静[1,2,3]

机构地区：[1]西安交通大学医学院第一附属医院内科学系 [2]环境与疾病相关基因教育部重点实验室 [3]陕西省分子心脏病学重点实验室,陕西西安710061

出　　处：《西安交通大学学报（医学版）》

基　　金：国家自然科学基金(No.30800455);中国高等教育博士点基金资助项目(No.200806981027)~~

年　　份：2010

卷　　号：31

期　　号：3

起止页码：288-292

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、EMBASE、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探究慢病毒载体介导绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记大鼠骨髓间充质干细胞(mes-enchymal stem cells,MSCs)的理想条件,以获得稳定高表达GFP的MSCs亚群。方法慢病毒载体介导GFP以25、50、100、200和400的感染复数(multiplicity of infection,MOI)分别作用12 h和24 h感染MSCs,倒置荧光显微镜及流式细胞术检测各组的感染效率和荧光强度,MTT法评价感染对MSCs增殖的影响,从而确定理想的感染条件。平皿克隆套环法挑选理想条件下感染的MSCs单克隆。结果MOI为100、200和400作用24 h时,感染效率较高,分别为88.94%、99.65%、99.42%;MOI为100和200时,感染对MSCs增殖无影响,MOI为400时,感染的MSCs增殖减慢。挑选MOI为200、作用24 h感染组的单克隆细胞,其1月时感染效率为99.95%,且荧光均一、强度很强。结论MOI为200作用24 h是慢病毒载体介导GFP标记MSCs的理想条件;通过细胞单克隆技术可获得稳定高表达GFP的MSCs亚群。

关 键 词：间充质干细胞 慢病毒载体 绿色荧光蛋白 单克隆

分 类 号：R329.2]