文献类型：期刊文章

作　　者：丁红雷[1,2] 潘竞[3] 张卫军[2] 张怡[2] 罗萍[2] 解庆华[2] 毛旭虎[2] 邹全明[2]

机构地区：[1]西南大学蚕学与系统生物学研究所,重庆400715 [2]第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室暨国家免疫生物制品工程技术研究中心,重庆400038 [3]第三军医大学学员旅20队,重庆400038

出　　处：《西南大学学报（自然科学版）》

基　　金：国家"863"资助项目(2006AA02A208)

年　　份：2010

卷　　号：32

期　　号：4

起止页码：46-50

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：为了解析cagT蛋白的结构,进而了解cagT基因在幽门螺杆菌致病中的作用,应用PCR技术从幽门螺杆菌26695菌株基因组中扩增cagT基因,T/A法克隆,连接至pET-28a(+)载体,转化宿主细胞E.coliBL21(DE3),IPTG诱导目的蛋白表达,亲和层析法纯化目的蛋白,免疫家兔制备抗体并鉴定其抗原性.成功克隆cagT基因,重组cagT基因片段的测序结果与GenBank上公布的序列相同.重组cagT蛋白以可溶和包涵体两种形式表达,免疫家兔所得的抗体滴度为1∶32.结果构建了高效表达cagT蛋白的重组载体pET-28a(+)-cagT,表达的蛋白具有良好的免疫原性,为后续的结构和功能研究奠定了基础.

关 键 词：幽门螺杆菌 cagT基因  基因克隆 Ⅳ型分泌系统  

分 类 号：Q93]