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尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列抗原位点分析及免疫保护效果观察
Epitope analysis of cDNA sequences of Deinagkistrodon acutus snake venom metalloproteinases and observation of their immune protective effects
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]云南大学生物资源保护与利用重点实验室,昆明650091 [2]成都军区疾病预防控制中心军事医学研究所,昆明650032 [3]成都军区疾病预防控制中心博士后科研工作站,昆明650032 [4]云南农业大学农学与生物技术学院,昆明650201 [5]云南大学现代生物学研究中心,昆明650091 [6]中国协和医科大学医学生物学研究所,昆明650118
基 金:中国博士后科学基金(20080440214)~~
年 份:2010
卷 号:31
期 号:4
起止页码:364-368
语 种:中文
收录情况:AJ、BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、UPD、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的采用生物信息学方法分析尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列的关键抗原位点,并观察根据这些位点设计合成的新型免疫原的免疫保护效果。方法扩增尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列,采用Jameson-Wolf方法和ClustalX软件结合的生物信息学方法分析其抗原位点,人工合成筛选的抗原位点序列,并连接到pIRESneo表达载体,3次(0、2、4周)对BALB/c小鼠进行核酸免疫,ELISA法测定免疫后机体抗体水平,出血中和实验和攻毒实验初步观察其免疫保护效果。结果生物信息学方法分析得到6个关键抗原位点(MPA-1~MPA-6);ELISA法检测抗血清结果表明,抗原位点序列诱导小鼠产生的抗血清相对未免疫的小鼠血清稀释100倍后仍能表现出阳性结果;出血中和实验和攻毒实验表明,将抗原位点序列免疫小鼠可以诱导机体产生免疫反应,使体内产生抗体,能有效中和蛇毒,从而对尖吻蝮蛇蛇毒引起的出血有防护作用。结论用生物信息学方法成功获得尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列的6个关键抗原位点,针对这些位点设计合成的新型免疫原展示出初步免疫保护效果。
关 键 词:生物信息学 尖吻蝮蛇 蛇毒液类 表位 抗蛇毒素类
分 类 号:R392.11]
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