文献类型：期刊文章

作　　者：钟发刚[1] 黄新[1] 王新华[1] 李娜[1]

机构地区：[1]新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆石河子832000

出　　处：《新疆农业科学》

基　　金：国家自然科学基金项目(30960286);国家重点基础研究计划(2008CB117017)

年　　份：2010

卷　　号：47

期　　号：4

起止页码：761-764

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2011_2012、FSTA、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：【目的】为牛病毒性腹泻病毒抗体快速检测提供敏感、特异检测方法。【方法】重组质粒pET-(1-345)转化宿主菌BL21(DE),以IPTG进行诱导表达,使外源基因获得了较高水平的表达;Westem一blot检测表达产物反应原性,同时进行特异性检测;将收集的纯培养物进行超声波裂解后以His bind kit蛋白质纯化试剂盒纯化回收目的蛋白,再以纯化后的目的蛋白作为包被抗原进行方阵滴定试验,确定目的蛋白作为包被抗原的最佳稀释度。【结果】重组蛋白表达可达菌体蛋白总量的19.7%,且具有较好的反应原性和特异性,以此方法建立的间接ELISA方法对收集的约43头份血清样品进行检测,检测阳性结果与进口试剂盒检测结果符合率达到93.55%。【结论】以BVDV E2重组蛋白作为抗原建立的间接ELISA检测方法是可行的,为其进一步的标准化莫定基础。

关 键 词：牛病毒性腹泻病毒 E2重组蛋白  ELISA

分 类 号：S851.653]