文献类型：期刊文章

作　　者：周晨妍[1] 符丹丹[2] 丰慧根[1] 邬敏辰[3] 王武[3]

机构地区：[1]新乡医学院生命科学技术系河南省医学遗传学与分子靶向药物重点实验室,河南新乡453003 [2]河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471003 [3]江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122

出　　处：《生物技术》

年　　份：2010

卷　　号：20

期　　号：2

起止页码：17-20

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、核心刊

摘　　要：目的:鉴定来源于宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的酸性木聚糖酶XynⅡ活性中心关键氨基酸残基。方法:对XynⅡ进行SWISS-MODEL同源建模和BLAST序列比较,分析XynⅡ中所有可能作为催化残基的保守氨基酸,采用定点突变手段对其进行鉴定研究。结果:只有Glu-79和Glu-170位于酶与底物作用的活性中心,它们分别位于β折叠股B6和B4上,推测Glu-79和Glu-170为XynⅡ活性中心关键氨基酸残基。将Glu-79和Glu-170突变为酸性的Gln,突变酶E79Q,E170Q在大肠杆菌和毕赤酵母中表达后,活性均丧失。结论:79位、170位Glu是木聚糖酶XynⅡ活性中心的关键氨基酸残基,为该酶进一步的结构与功能研究提供了理论基础。

关 键 词：酸性木聚糖酶  宇佐美曲霉 定点突变 活性中心

分 类 号：Q786]