文献类型：期刊文章

作　　者：高波[1,2] 段志坚[1,2] 徐薇[1,2] 熊思东[1,2]

机构地区：[1]复旦大学免疫生物研究所 [2]复旦大学上海医学院免疫学系,上海200032

出　　处：《微生物与感染》

基　　金：国家自然科学基金(30872355;30891041);上海市科委基础重点项目(08JC1401200;09JC1401800);上海市医学领军人才基金(LJ06011);教育部博士点基金(20090071120060)

年　　份：2010

卷　　号：5

期　　号：1

起止页码：31-35

语　　种：中文

收录情况：PUBMED、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：本文旨在探讨TRIM22 C端SRPY结构域对其转录、翻译及亚细胞定位的影响。以野生型TRIM22真核表达质粒为模板,扩增出C端SPRY结构域缺失的TRIM22基因片段,并将其克隆入真核表达质粒pcDNA3.1。将野生型和突变型TRIM22真核表达载体分别转染高分化人肝癌细胞株HepG2。通过反转录-聚合酶链反应检测其mRNA表达水平,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测其蛋白表达水平,并通过间接免疫荧光法检测其亚细胞内定位。结果成功构建了C端SPRY结构域缺失的TRIM22真核表达质粒。转染HepG2细胞后,TRIM22 SPRY结构域缺失突变体在转录和翻译水平上均与野生型TRIM22无明显差异,但TRIM22 SPRY结构域缺失突变体完全丧失了核定位能力,这为进一步研究SPRY结构域在TRIM22抗病毒过程中所发挥的作用及机制提供了有益的启示。

关 键 词：TRIM22  SPRY结构域  突变 表达  亚细胞定位

分 类 号：Q78]