文献类型：期刊文章

作　　者：王亚琳[1] 张湘燕[1] 王压娣[2] 车小燕[2] 郭晓奎[1]

机构地区：[1]上海交通大学医学院基础医学院病原生物学教研室,上海200025 [2]南方医科大学珠江医院临床医学院基础研究所,广州510282

出　　处：《微生物与感染》

基　　金：国家自然科学基金(30670102)

年　　份：2010

卷　　号：5

期　　号：1

起止页码：26-30

语　　种：中文

收录情况：PUBMED、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：LipL32是钩端螺旋体外膜中含量最丰富的蛋白,有很好的免疫原性,且在致病性钩端螺旋体中高度保守。在非变性条件下纯化LipL32重组蛋白,与佐剂混匀后免疫BALB/c小鼠,取脾脏细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合,然后用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和有限稀释法分别进行筛选和细胞克隆,获得29株能稳定分泌抗LipL32单克隆抗体的杂交瘤细胞株,它们能识别8个LipL32抗原表位。用这些细胞株制备腹水型抗体,并对特性进行鉴定。用生物素标记这些抗体后两两配对,采用双抗夹心ELISA检测提取自15株致病性钩端螺旋体及其他致病菌的抗原,以评估单克隆抗体的灵敏度和特异度。筛选出1对灵敏度高和特异度好的单克隆抗体,ELISA检测rLipL32的最低浓度为1ng/ml。结果提示,该钩端螺旋体外膜蛋白LipL32单克隆抗体及检测方法有很好的应用前景。

关 键 词：钩端螺旋体 LIPL32 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验

分 类 号：R392]