文献类型：期刊文章

作　　者：刘金仙[1,2] 阙友雄[1] 郭晋隆[1] 许莉萍[1] 徐景升[1] 陈如凯[1]

机构地区：[1]福建农林大学作物科学学院/农业部甘蔗遗传改良重点开放实验室 [2]武夷学院茶学与生物系,福建武夷山354300

出　　处：《中国农业科学》

基　　金：国家"863"计划项目(2007AA100701);福建省自然科学基金项目(2009J05050);福建省科技厅国家科技项目备案项目(F2007AA100701);农业部"948"计划项目(2006-G37);农业部"948"项目(甘蔗抗旱基因高通量筛选鉴定技术的引进);现代农业产业技术体系建设专项资金项目(nycytx-024)

年　　份：2010

卷　　号：43

期　　号：7

起止页码：1448-1457

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、FSTA、GEOBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：【目的】克隆甘蔗(Saccharum officinarum)S-腺苷蛋氨酸脱羧酶(S-adenosylmethionine decarboxylase,SAMDC)基因,并进行序列特征、原核表达和不同逆境胁迫下表达特性分析。【方法】通过对甘蔗茎全长cDNA文库测序和分析,获得SAMDC基因cDNA全长,命名为Sc-SAMDC,并进行序列分析。随后将编码S-腺苷蛋氨酸脱羧酶的cDNA片段克隆到原核表达载体pET29a(+)中,构建融合表达质粒,转化至Esherichia coli BL21(DE3)中进行表达。最后利用定量PCR技术分析甘蔗幼苗中该基因在不同外源胁迫下的表达特性。【结果】序列分析显示,甘蔗Sc-SAMDC基因(GenBank Accession number:GQ246459)cDNA全长1968bp,存在3个读码框(袖珍读码框tORF、上游读码框uORF和主读码框mORF),mORF长1200bp,编码399个氨基酸的SAMDC酶原,预测分子量为43.6kD,该酶原含有两个高度保守的功能结构域(酶原剪切位点和PEST结构域)。原核表达产物经SDS-PAGE表明,Sc-SAMDC以融合蛋白形式表达,相对分子量约为50kD。定量PCR分析表明,Sc-SAMDC基因在聚乙二醇(PEG)、NaCl、水杨酸(SA)和H2O2外源胁迫下表达特性不同,受PEG和NaCl的诱导,受SA和H2O2的抑制。【结论】本研究成功地克隆了Sc-SAMDC基因并在原核生物中进行了表达研究,分析了该基因的表达特性,为其进一步的生物学功能研究及其应用奠定了基础。

关 键 词：甘蔗 S-腺苷蛋氨酸脱羧酶  序列分析  原核表达 定量PCR

分 类 号：S566.1]