文献类型：期刊文章

作　　者：冯年花[1,2] 谢安[1] 娄远蕾[1] 阮琼芳[1] 郭菲[1] 吴珏[1,2] 邓志锋[3] 汪泱[1]

机构地区：[1]南昌大学泌尿外科研究所 [2]南昌大学研究生院医学部 [3]南昌大学第二附属医院神经外科,江西南昌330006

出　　处：《实验与检验医学》

基　　金：国家自然科学基金(30960385);江西省自然科学基金(2007GZY1470)

年　　份：2010

卷　　号：28

期　　号：1

起止页码：6-8

语　　种：中文

收录情况：CAS、JST、UPD、普通刊

摘　　要：目的建立稳定的人诱导性多能干细胞(iPS细胞)培养体系。方法取第3～5代的小鼠胚胎成纤维细胞,丝裂霉素C处理后用作饲养层。人iPS细胞接种于饲养层上生长,胶原酶消化或机械法传代。倒置显微镜下观察iPS细胞生长状态;观察拟胚体形成能力;RT-PCR检测iPS细胞多能性基因的表达情况。结果(1)小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为贴壁生长细胞,呈梭形或多角形。细胞增殖旺盛。(2)生长在饲养层上的人iPS细胞呈典型的克隆状生长。克隆呈圆形或椭圆形,边界清晰。克隆内细胞排列紧密,细胞体积小,核大,细胞核/质比高。RT-PCR结果显示人iPS细胞强表达多能性基因Oct4,Nanog,Sox2;去除饲养层后悬浮培养能形成拟胚体(EB)。结论本实验的培养体系适合人iPS细胞的培养,人iPS细胞能稳定增殖,保持自我更新及分化潜能。

关 键 词：人诱导性多能干细胞  细胞培养 饲养层

分 类 号：R446.113] Q813.11[临床医学类]