期刊文章详细信息
尖锐湿疣患者血清及宫颈分泌物HPV6bE7抗体检测方法的建立及流行病学意义
Studies on the establishment of a method to detect HPV 6b E7-specific antibodies of serum and cervical secretion from patients with condyloma acuminatum and its epidemiological significance
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]温州医学院微生物学与免疫学教研室/分子病毒与免疫研究所,325035 [2]温州医学院附属第二医院妇产科
基 金:基金项目:国家自然科学基金(30671882);浙江省医药卫生重点科技基金(2005ZD011);温州市科技计划项目(Y20060081)
年 份:2010
卷 号:31
期 号:2
起止页码:199-203
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的建立尖锐湿疣(CA)患者血清和宫颈分泌物人乳头瘤病毒(HPV)6b型E7特异性抗体检测方法。方法利用PCR扩增HPV6bE7全长基因,构建重组原核表达质粒pET32a(+)/HPV6bE7,原核表达产物采用SDS—PAGE和Western blot进行鉴定。进一步经镍螯合亲和层析法(Ni—NTAAgarose)纯化后作为包被抗原,以间接ELISA方法分别对56例CA患者、81名健康对照者的血清和宫颈分泌物标本巾的特异性抗体进行检测,另取43例宫颈癌患者的血清标本作为对照;同时用PCR方法对56例CA组织标本进行HPV6bDNA的检测。结果从CA组织标本中扩增的HPV6bE7全长基因与标准序列(GenBank登录号:NC001355)同源性为99.5%。HPV6bE7融合蛋白在原核表达系统中得到了较高效的表达(40μg/ml)。经间接ELISA检测,CA组血清特异性IgG抗体水平明显高于宫颈癌组和健康对照组(P〈O.05),吸光度(A)均值分别为1.82±0.48、1.36±0.39和1.39±0.27。CA组宫颈分泌物特异性slgA抗体水平亦显著高于健康对照组(P〈0.05),A值分别为O.63±0.26和0.53±0.06。经PCR检测,CA患者组织HPV6bE7DNA阳性率为78.6%(44/56)。与PCR检测结果比较,HPV6bE7特异性IgG和sIgA抗体用于检测CA患者HPV6b感染的敏感性分别为68.2%(30/44)、54.6%(24/44),特异性均为100%(12/12)。结论CA患者血清和宫颈分泌物HPV6bE7特异性抗体,用于诊断HPV6b感染具有一定的敏感性和较高的特异性,可用于HPV6b感染的流行病学调查。
关 键 词:尖锐湿疣 人乳头瘤病毒 血清 宫颈分泌物 6b E7抗体
分 类 号:R737.33]
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