文献类型：期刊文章

作　　者：张威[1,2] 陈玉[1,2] 亚国伟[1,2] 陈奎生[1,2]

机构地区：[1]郑州大学第一附属医院病理科 [2]河南省肿瘤病理重点实验室,郑州450052

出　　处：《郑州大学学报（医学版）》

基　　金：河南省杰出青年科学基金资助项目074100510009;河南省科技攻关计划基金资助项目082102310011;河南省基础与前沿技术研究计划基金资助项目092300410016;郑州市科技创新团队基金项目课题

年　　份：2010

卷　　号：45

期　　号：1

起止页码：11-15

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSA、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:探讨RNA干扰技术对人食管癌EC9706细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达及细胞生长与凋亡的影响。方法:设计合成mTORsiRNA,采用低、中、高浓度(50、100与150nmol/L)的mTORsiRNA分别转染EC9706细胞24、48与72h,同时设无义对照组(转染无义对照siRNA)、空白对照组(转染空脂质体)及正常对照组(不转染)。采用免疫细胞化学与原位杂交法分别检测各组EC9706细胞中mTOR蛋白与mRNA的表达;应用MTT法检测细胞增殖,计算细胞生长抑制率;应用TUNEL法检测转染24h时细胞凋亡,计算凋亡指数(AI)。结果:转染24、48与72h,6组细胞mTOR蛋白和mRNA的表达差异均有统计学意义(mTOR蛋白:F=24.14,45.78,59.19,P均<0.001;mTORmRNA:F=41.42,69.74,43.71,P均<0.001),细胞生长抑制率差异亦有统计学意义(F=143.85,172.98,155.01,P均<0.001);低、中、高浓度组转染不同时间点间比较,mTOR蛋白(F=42.23,29.46,50.22,P均<0.001)、mTORmRNA(F=6.48,8.50,4.80,P均<0.05)及细胞生长抑制率(F=78.77,76.14,52.28,P均<0.001)差异均有统计学意义。mTORsiRNA转染组EC9706细胞mTOR蛋白与mRNA的表达均低于各对照组,且mTOR蛋白及mRNA的表达随mTORsiRNA浓度的增加及转染时间的延长而减弱(P<0.05)。不同浓度mTORsiRNA转染组EC9706细胞生长抑制率均高于各对照组,且细胞生长抑制率随mTORsiRNA浓度的增加和转染时间的延长而升高(P<0.05)。转染24h,6组细胞AI相比,差异有统计学意义(F=442.96,P<0.001),mTORsiRNA转染组AI均高于各对照组,且高浓度转染组AI高(P<0.05)。结论:mTORsiRNA可有效抑制EC9706细胞mTOR蛋白与mRNA的表达,且能抑制EC9706细胞的增殖并促进其凋亡。

关 键 词：食管肿瘤 癌  EC9706细胞 MTOR RNA干扰 增殖  凋亡

分 类 号：R735.1]