文献类型：期刊文章

作　　者：吴淑江[1] 祝骥[2] 李敏[2] 易喻[2] 梅建凤[2] 朱克寅[3] 应国清[2]

机构地区：[1]艾博生物医药(杭州)有限公司,浙江杭州310018 [2]浙江工业大学药学院,浙江杭州210014 [3]杭州博林生物技术有限公司,浙江杭州310018

出　　处：《药物生物技术》

年　　份：2010

卷　　号：17

期　　号：1

起止页码：67-72

语　　种：中文

收录情况：AJ、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2011_2012、EMBASE、IC、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：建立从小鼠腹水中纯化抗乙肝核心抗原(HBcAg)单克隆抗体的一步层析法。将含抗HBcAg单克隆抗体的腹水经离心、过滤和缓冲溶液变换预处理后,采用HiTrap rProtein A FF亲和层析柱纯化,并探讨了上样缓冲液的pH值和NaCl浓度,洗脱液的种类、pH值以及体积流量对抗体纯度及回收率的影响,纯化后的单克隆抗体的生物学活性用间接ELISA法测定。结果显示,以pH7.0,20mmol/LPB+3.0mol/LNaCl为上样缓冲液,0.1mol/LGly-HCl为洗脱液,体积流量为5.0ml/min时,抗HBcAg单抗的纯度大于95%,回收率达75%,纯化后的单克隆抗体的生物学活性没有下降。本研究建立了蛋白A亲和层析法纯化抗HBcAg单克隆抗体的方法,其操作简便、快速而且效果良好。

关 键 词：蛋白A亲和层析  单克隆抗体 乙肝核心抗原 纯化

分 类 号：Q511]