期刊文章详细信息
变性高效液相色谱法检测结核分枝杆菌利福平耐药基因突变的初步探索
Application of denaturing high perfomance liquid chromatography in detection of rpoB mutations associated with rifampin resistance in Mycobacterium tuberculosis
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]河北医科大学病原生物学教研室,石家庄050017 [2]兰州大学结核病研究中心暨病原生物学研究所 [3]甘肃省疾病预防控制中心 [4]兰州大学遗传学研究所 [5]兰州大学循证医学中心 [6]Department of Molecular Microbiology and Immunology, Bloomberg School of Public Health, Johns Hopkins University
基 金:教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-07-0403)基金资助项目;甘肃省科技攻关计划基金资助项目(0708NKCA110)
年 份:2010
卷 号:33
期 号:2
起止页码:128-131
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2008、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的探讨变性高效液相色谱(DHPLC)技术在MTB的利福平耐药菌株rpoB基因突变检测中的应用价值。方法PCR扩增MTB的rpoB基因利福平耐药决定区,扩增产物与野生型DNA链形成异源双链,在65.4℃柱温下进行DHPLC分析。对DHPLC不同峰型菌株的rpoB基因片段进行测序,评价DHPLC技术的敏感度和特异度。结果共分析46株MTB菌株,其中42株对利福平耐药,4株对利福平敏感。经DHPLC分析,产生15种不同图谱。测序结果表明,各图谱菌株突变特征不同。除D108和D24菌株的DHPLC峰形相同而突变特征不同外,其他菌株均为DHPLC峰型与基因多态性相一致,即DHPLC峰型相同则基因多态性相同,DHPLC峰型不同则基因多态性不同。结论DHPLC具有简便快捷、高通量和自动化的特点,敏感度和特异度高,可用于快速检测耐药MTB的基因突变。
关 键 词:分枝杆菌 结核 抗药性 突变 色谱法 高压液相
分 类 号:R378]
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