文献类型：期刊文章

作　　者：蒋锦琴[1,2] 阮萍[3] 丁威[4] 孙爱华[2] 毛亚飞[1] 严杰[1]

机构地区：[1]浙江大学医学院病原生物学系,杭州310058 [2]浙江医学高等专科学校,杭州310053 [3]浙江绍兴文理学院医学院医学检验系,312000 [4]浙江省血液中心

出　　处：《中华微生物学和免疫学杂志》

基　　金：浙江省自然科学基金（Y2090395）;浙江省医药卫生科学研究基金（2006A116）;浙江医学高等专科学校自然科学研究基金（2005xZ04）

年　　份：2010

卷　　号：30

期　　号：1

起止页码：1-5

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建甲型副伤寒杆菌ompA基因原核表达系统，确定其重组表达产物rOmpA免疫原性和保护作用，检测甲型副伤寒杆菌临床菌株ompA基因携带率。方法采用PCR从甲型副伤寒杆菌临床株JH01中扩增ompA基因，T-A克隆后测序并构建ompA基因原核表达系统。采用SDS-PAGE和Bio—Rad凝胶图像分析系统检测rOmpA表达情况及其产量，采用免疫扩散法、微量肥达试验和Western blot鉴定其抗原性和免疫反应性。采用PCR检测98株甲型副伤寒杆菌临床菌株ompA基因携带率。采用小鼠感染模型，了解rOmpA对甲型副伤寒杆菌50001株感染的免疫保护作用。结果与报道的相关序列比较，所克隆的ompA基因核苷酸和氨基酸序列相似性均为100％。rOmpA表达量约为细菌总蛋白的65％。rOmpA能与其兔抗血清和甲型副伤寒杆菌全菌抗血清产生免疫反应（Western blot），并可在家兔中诱导产生抗体。94．9％（93／98）甲型副伤寒杆菌临床菌株含有ompA基因。100μg和200μg rOmpA对感染小鼠的免疫保护率分别为41．7％（5／12）和58．3％（7／12）。rOmpA免疫小鼠或保护试验存活小鼠血清对各副伤寒杆菌H抗原的凝集效价为1：5～1：40。结论ompA基因在甲型副伤寒杆菌临床菌株中分布广泛。rOmpA有良好的免疫原性和一定的免疫保护作用，可考虑为甲型副伤寒杆菌基因工程疫苗候选抗原。

关 键 词：甲型副伤寒杆菌 ompA基因  重组表达  免疫原性 免疫保护性

分 类 号：R378.23] R446.62[基础医学类]