文献类型：期刊文章

作　　者：苏晓杰[1] 武凤君[1] 袁丽杰[1] 林雪松[1]

机构地区：[1]哈尔滨医科大学大庆校区医学检验系,黑龙江大庆163319

出　　处：《吉林大学学报（医学版）》

基　　金：黑龙江省科技厅自然科学基金资助课题(d200877)

年　　份：2010

卷　　号：36

期　　号：1

起止页码：86-89

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：目的:利用已成功构建的肿瘤抑素相关活性肽T42肽高效表达基因工程重组菌pTYB2-T42,提取纯化T42肽,检测其抗肿瘤活性,为研究T42肽抗肿瘤作用机制及新型抗肿瘤药物研发提供实验基础。方法:将pTYB2-T42大肠杆菌进行培养,IPTG诱导其产生融合蛋白,经几丁质柱亲和层析得到目的蛋白,葡聚糖凝胶G15去除DTT干扰,TricineSDS-PAGE鉴定T42肽,紫外分光光度法检测其浓度。MTT检测T42肽对细胞的生长增殖抑制作用,AO/EB荧光染色检测细胞凋亡形态学变化。结果:提取的T42肽其相对分子质量在5000左右,与理论值4600一致。MTT实验结果显示:T42肽作用下Hepg2细胞生长增殖受到抑制,且随着T42肽浓度的增加,Hepg2细胞存活率逐渐下降,其半数抑制浓度(IC50)为30mmol.L-1;AO/EB荧光染色结果表明:经过30mmol.L-1T42肽作用24h后的Hepg2细胞表现出细胞皱缩呈圆形或卵圆形,核皱缩变形且胞膜受损等一系列细胞凋亡特征性的形态变化。结论:T42肽具有显著的抗肿瘤细胞活性,可明显抑制人肝癌细胞Hepg2的生长增殖,并促进其凋亡。

关 键 词：肿瘤抑素 亲和层析  抗肿瘤活性  半数抑制浓度

分 类 号：Q78] R735.7]