文献类型：期刊文章

作　　者：阎淑滑[1] 周波[1] 赵霞[1] 李玉花[1]

机构地区：[1]东北林业大学生命科学学院发育生物学研究室,黑龙江哈尔滨150040

出　　处：《生物技术通讯》

年　　份：2010

卷　　号：21

期　　号：1

起止页码：35-38

语　　种：中文

收录情况：CAS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:构建以木糖异构酶基因xylA为筛选标记的无抗生素标记Gateway系统植物表达载体。方法:克隆大肠杆菌木糖异构酶基因xylA并用其替换植物表达载体pCAMBIA1301中的hpt基因,利用载体中的多克隆位点将Gateway Binary Vector(pH7WG2D)中酶切位点XbaⅠ和HindⅢ之间包括P35S、T35S、attR1、attR2和CmR-ccdB的片段重组入表达载体pCAMBIA1301中,构建表达载体pCAMBIA1301-xylA-GW,利用含有津田芜菁HY5基因片段的BP反应产物与载体进行LR反应,获得含有目的基因的植物表达载体pCAMBIA1301-xylA-HY5,并导入根癌农杆菌LBA4404中。结果:抗生素筛选及酶切和PCR鉴定表明成功构建了以xylA为筛选标记的无抗生素标记植物表达载体pCAMBIA1301-xylA-HY5。结论:利用木糖异构酶基因xylA结合Gateway克隆技术构建无抗生素标记植物表达载体,可简化、方便植物转基因表达载体构建。

关 键 词：GATEWAY技术 木糖异构酶基因 LR反应  植物表达载体

分 类 号：Q78]