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期刊文章详细信息

正交优化多重PCR反应体系检测3种食源性致病菌的研究    

Application of Orthogonal Design to Optimize Multiplex PCR Reaction System for Detection of Three Food-borne Bacterial Pathogens

  

文献类型:期刊文章

作  者:郝玉芹[1] 孙皆宜[1] 李艾[2] 杨国兴[3] 张伟[4]

机构地区:[1]唐山学院基础教学部,河北唐山063000 [2]唐山学院环境与化学工程系,河北唐山063000 [3]河北省邯郸市疾病预防控制中心,河北邯郸056000 [4]河北农业大学食品科技学院,河北保定071000

出  处:《安徽农业科学》

年  份:2010

卷  号:38

期  号:2

起止页码:602-605

语  种:中文

收录情况:BDHX、BDHX2008、CAS、JST、RCCSE、核心刊

摘  要:[目的]建立金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌的快速、敏感、特异的多重PCR检测方法。[方法]根据金黄色葡萄球菌的nuc基因、沙门氏菌的IpaB基因、志贺氏菌的ipaH基因,设计3对特异性引物进行多重PCR检测,利用正交设计对多重PCR反应体系的镁离子、Taq酶、dNTP、引物的浓度在4个水平上进行L16(44)优化试验,并确定该检测方法的特异性与灵敏度。[结果]3对引物能特异性扩增出210、280、393 bp的目的条带。利用FTA滤膜提取模板DNA,采用建立多重PCR同时对3种食源性致病菌进行检测具有较高的灵敏度,灵敏度金黄色葡萄球菌为3.5×102cfu/ml、沙门氏菌为2.2×102cfu/ml、志贺氏菌为1.0×102cfu/ml。[结论]该检测方法准确、快速、高效,为同时检测食品中多种致病菌奠定了基础。

关 键 词:多重PCR 食源性致病菌 检测  FTA滤膜

分 类 号:S188]

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同被引文献:

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