文献类型：期刊文章

作　　者：胡亚冬[1,2] 姚冬生[2]

机构地区：[1]广州科仁生物工程有限公司,广州510600 [2]暨南大学微生物技术研究所,广州510632

出　　处：《中国生物工程杂志》

基　　金：国家十一五"863"计划重点项目(2007AA100605)资助项目

年　　份：2009

卷　　号：29

期　　号：12

起止页码：49-53

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以pPIC9为模板,通过PCR扩增获得酿酒酵母的α-交配因子(α-factor),并克隆至酿酒酵母胞内表达载体pYES2/CT中,构建了一种新型酿酒酵母附加型分泌表达载体pYES2/CT/α-factor(pYCα)。再将甘露聚糖酶基因(mannase,man)通过酶切、连接克隆至pYCα的α-factor的下游,构建了pYCα-man重组载体检验pYCα的分泌性能和稳定性。结果显示α-factor可引导甘露聚糖酶基因在胞外分泌表达,在曲利本兰培养基上形成明显的水解圈,进一步分析重组菌胞外和胞内酶活,结果显示对照INVSc1/pYCα的两种酶活都未检测到,而INVSc1/pYCα-man具有明显的胞外酶活,未检测到胞内酶活,说明构建的pYCα具有良好的分泌性能;稳定性实验表明重组质粒连续培养150 h仍具有良好的稳定性。

关 键 词：酿酒酵母 信号肽 分泌表达

分 类 号：Q782]