文献类型：期刊文章

作　　者：杨卫东[1] 赵荣[1] 秦伟伟[2] 王涛[2] 陈锐[2] 汪静[1]

机构地区：[1]第四军医大学西京医院核医学科,西安710032 [2]第四军医大学国家肿瘤生物重点实验室

出　　处：《中华核医学杂志》

年　　份：2009

卷　　号：29

期　　号：6

起止页码：379-382

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、核心刊

摘　　要：目的拟建立用放射性核素测量microRNA（即miRNA）在肿瘤细胞中表达的新方法，探讨miRNA与肿瘤的关系。方法分别克隆人钠／碘同向转运体（hNIS）及可与let-7互补结合的ras基因的3′非翻译区（3′-UTR），即RU序列；以hNIS作为报告基因，将ras基因的3′-UTR与hNIS连接构建融合基因（hNIS—RU），使hNIS的表达受let-7的调控；同时克隆前体let-7（pri-let-7）及前体mir143（pri—mir143），转入细胞后加工形成成熟的let-7及mir143。将hNIS及hNIS—RU分别转染肺腺癌A549细胞，转染24h后，于培养液中分别加入37kBq^125I，1h后收集细胞并测量^125I计数；将hNIS-RU分别与不同量的pri-let-7或pri—mir143共转染A549细胞，转染细胞24h后分别测量其对Na^125I的摄取。结果转染hNIS的A549细胞^125I摄取明显增高，是未转染A549细胞的12倍；转染hNIS—RU的A549细胞^125I的摄取减低，为转染hNIS A549细胞的70％，是未转染A549细胞的8倍；hNIS—RU及pri—let-7共转染A549细胞的放射性计数进一步降低，为转染hNISA549细胞的50％；转染hNIS—RU不变，增加pri—let-7的转染量，^125I的摄取随pri—let-7的增加而降低；转染hNIS—RU不变，共转染不同浓度的pri-mir143，A549细胞对^125I的摄取基本不变。结论构建了hNIS—RU融合基因，hNIS在细胞中的表达受let-7的调节，二者呈反比关系。初步建立了以hNIS为报告基因测量miRNA在细胞中表达的高灵敏度放射性核素新方法。

关 键 词：肺肿瘤 基因 钠/碘同向转运体  MICRORNA

分 类 号：R686]