文献类型：期刊文章

作　　者：李黄金[1] 赵林[1] 陈伟[1] 刘家劲[1] 李秋[1] 郭志云[1] 林冬霞[1] 田素娟[1] 黄树林[1]

机构地区：[1]广东药学院生命科学与生物制药学院生物技术系,广州510006

出　　处：《现代预防医学》

基　　金：广东省科技攻关计划资助项目(2007A020300007-8;2006B20501005);广东药学院科研启动基金(2006SMK06)

年　　份：2009

卷　　号：36

期　　号：24

起止页码：4655-4658

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、IC、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：[目的]克隆并分析抗氯霉素单克隆抗体(抗CAPmAb)的轻、重链可变区基因VL和VH。[方法]从分泌抗CAPmAb的杂交瘤细胞株4D10中提取总RNA,利用RT-PCR技术和一系列简并引物扩增VL和VH基因,扩增产物克隆于pMD18-T后测序,利用VBASE2数据库进行比对分析。[结果]有多对引物扩增到VL或VH基因,但同一基因的不同引物扩增到的序列相同。VL和VH基因长度分别为342bp和357bp,分别编码114个和119个氨基酸残基,编码产物均具有4个FR区、3个CDR区和2个特征性半胱氨酸残基,符合典型的KABAT结构特点,分别属于IGKV1亚群和IGH-V3609VH8家族。所克隆序列已被GenBank收录,序列号分别为FJ477893和FJ477894。[结论]成功克隆到抗CAPmAb的VL和VH基因,为进一步构建氯霉素残留检测用基因工程抗体打下了基础。

关 键 词：抗氯霉素单克隆抗体  轻链可变区基因 重链可变区基因 克隆 序列分析  

分 类 号：R392.11] R392-33[基础医学类]