文献类型：期刊文章

作　　者：高兴[1] 赵健[1] 范立强[1] 李素霞[1] 王富军[2] 姬胜利[3] 袁勤生[1]

机构地区：[1]华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237 [2]浙江日升昌药业有限公司,浙江322100 [3]山东大学药学院,济南250012

出　　处：《生物工程学报》

基　　金：Supported by:Open Project Program of the State Key Laboratory of Bioreactor Engineering(No.F200-B-0232)~~

年　　份：2009

卷　　号：25

期　　号：11

起止页码：1718-1724

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：肝素酶III是一种特异性地裂解乙酰肝素的酶,在大肠杆菌中表达时容易形成包涵体。为实现肝素酶III的可溶性表达,利用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)与肝素酶III融合性能,通过构建相应的表达质粒pGEX-heparinaseIII,在大肠杆菌中实现了肝素酶Ⅲ的可溶性表达。粗酶通过一步亲和纯化其纯度可达95%以上。通过对LB培养基摇瓶培养Escherichia coli BL21的诱导时机、诱导剂用量、诱导时间等培养条件的优化,确定了该可溶性肝素酶III融合蛋白的最适生产条件。通过对纯酶的最适反应温度、pH、Ca2+浓度等一系列性质研究,确定了该酶的最适反应条件。

关 键 词：肝素酶Ⅲ  谷胱甘肽-S-转移酶 肝素黄杆菌  可溶性表达 表征  

分 类 号：Q78]