期刊文章详细信息
蝴蝶兰ACC合成酶基因片段的克隆及其反义表达载体的构建
cDNA Cloning and Construction of Antisense Expression Vector of Phalaenopsis ACC Synthase
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]河南农业大学生命科学学院,河南郑州450002 [2]郑州师范高等专科学校生物工程研究所,河南郑州450044
基 金:河南省科技攻关项目(092102110128)
年 份:2009
卷 号:37
期 号:34
起止页码:16781-16782
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2008、CAS、JST、RCCSE、核心刊
摘 要:[目的]克隆蝴蝶兰ACC合成酶cDNA片段,构建其反义表达载体。[方法]根据已报道的蝴蝶兰ACC合成酶的基因序列,设计并合成了1对引物,通过RT-PCR以蝴蝶兰总RNA中扩增出ACC合成酶的cDNA片段,将其连接到MD19-T质粒载体上进行测序。用XbaⅠ和SacⅠ对重组质粒和pBI221酶切后连接,构建蝴蝶兰ACC合成酶的反义基因表达载体。[结果]获得了蝴蝶兰ACC合成酶的cD-NA片段,测序结果显示,该片段与参考的已报道序列具有98.92%和76.36%的同源性。通过引入XbaⅠ和SacⅠ酶切位点,进行载体构建,构建了蝴蝶兰ACC合成酶的反义基因表达载体。[结论]成功构建了蝴蝶兰ACC合成酶的反义基因植物表达载体,为进一步研究其对蝴蝶兰花期和生长的影响打下了基础。
关 键 词:蝴蝶兰 ACC合成酶 基因克隆 反义基因 植物表达载体构建
分 类 号:Q785] S682.31]
参考文献:
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