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酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-UL49的构建、表达与鉴定
Construction and identification of yeast two-hybrid bait vector pGBKT7-UL49
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]暨南大学广东省生物工程药物重点实验室,广东广州510600 [2]广州市职业病防治院,广东广州510620
基 金:国家自然科学基金重大计划面上项目(No:90608024);广东省科技计划项目(No:2006B35502002)
年 份:2009
卷 号:19
期 号:22
起止页码:3374-3377
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的构建人巨细胞病毒UL49基因的诱饵表达载体,以利于筛选与pUL49相互作用的蛋白。方法PCR扩增UL49全序列,克隆入pGBKT7,将构建好的pGBKT7-UL49转化到酵母细胞AH109;用蛋白印迹法分析诱饵蛋白的表达,检测诱饵蛋白有无毒性和自激活效应。结果克隆成功pGBKT7-UL49;pG-BKT7-UL49成功转化到AH109,转化细胞AH109[pGBKT7-UL49]表达诱饵蛋白pUL49,pUL49对转化细胞无细胞毒性、无自激活。结论成功构建了酵母诱饵表达载体pGBKT7-UL49,为进一步筛选与pUL49相互作用的蛋白提供了实验基础。
关 键 词:酵母双杂交 人巨细胞病毒 UL49 质粒构建 诱饵蛋白
分 类 号:Q733]
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