文献类型：期刊文章

作　　者：祝骥[1] 易喻[1] 吴银飞[2] 朱克寅[3] 梅建凤[1] 陈建澍[1] 应国清[1]

机构地区：[1]浙江工业大学药学院,杭州310014 [2]艾博生物医药(杭州)有限公司,杭州310018 [3]杭州博林生物技术有限公司,杭州310018

出　　处：《生物工程学报》

年　　份：2009

卷　　号：25

期　　号：10

起止页码：1572-1578

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：采用金属螯合亲和层析法,纯化了小鼠腹水来源的抗乙肝核心抗原单克隆抗体,对上样缓冲液的pH和离子强度、洗脱液种类和洗脱方式进行优化。结果表明,采用降低pH分步洗脱时,最佳上样缓冲液为pH8.0,20mmol/LPB+0.5mol/LNaCl,抗体在pH5.0被洗脱下来,抗体回收率80%,纯度85%。采用咪唑浓度梯度洗脱时,最佳的上样缓冲液为pH8.0,20mmol/LPB+5mmol/L咪唑,抗体纯度大于95%,回收率65%;在上样缓冲液中不添加NaCl而添加少量的咪唑,更有利于抗体分离。以上洗脱方式都能较好地保持mAb的生物学活性,为该抗体的应用提供了必要的实验基础。

关 键 词：金属螯合亲和层析 单克隆抗体 乙肝核心抗原 小鼠腹水

分 类 号：R392.1]