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农杆菌介导的高效玉米遗传转化体系的建立
Establishment of high efficiency genetic transformation system of maize mediated by Agrobacterium tumefaciens
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]漳州师范学院生物科学与技术系,福建漳州363000
基 金:福建省自然科学基金项目(编号:B0810040);福建省教育厅A类科技项目(编号:JA08154)资助
年 份:2009
卷 号:31
期 号:11
起止页码:1158-1170
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2008、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:为了建立玉米高频再生及高效遗传转化体系,对影响玉米胚性愈伤组织诱导的11个因素及影响胚性愈伤分化的9个因素用正交实验方法进行研究。结果显示,基因型对胚性愈伤诱导有极显著影响。6-BA、培养基、AgNO3、2,4-D、ABA对胚性愈伤诱导的影响达到显著水平。多重比较分析显示ABA2mg/L每间隔1代添加对胚性愈伤诱导率有显著影响。在影响分化的因素中,基因型和6-BA浓度表现出极强的主效应,NAA、培养基、KT、2,4-D对分化产生显著影响。Southern blotting分析表明,25mg/L潮霉素选择压下抗性愈伤率作为转化体系优化指标是可靠的。在影响转化效率的因素中,acetosyringone(AS)使用浓度因基因型不同而表现出敏感度差异,共培养温度24~25℃、农杆菌浓度和浸泡时间0.7OD×15min,以及pH值5.5~6.2是最高转化率的优选组合。在整合后的玉米遗传转化体系中,黄早4和综31自交系以抗性愈伤率为指标的GUS基因稳定转化率分别达到48.6%和46.2%。
关 键 词:玉米 正交实验 胚性愈伤诱导率 抗性愈伤率 农杆菌介导 遗传转化率
分 类 号:S513] S511
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