文献类型：期刊文章

作　　者：黄连真[1] 王林[1] 陈金烟[1] 林万松[1] 林建银[1] 林旭[1]

机构地区：[1]福建医科大学分子医学研究中心,福建省高校感染与肿瘤重点实验室,福建福州350004

出　　处：《中国病原生物学杂志》

基　　金：国家自然科学基金项目(No.30840069);全国优秀博士学位论文作者专项资金资助项目(No.200359);福建省高等学校科技创新团队培育计划基金项目(No.FMU-RT001)

年　　份：2009

卷　　号：4

期　　号：10

起止页码：721-725

语　　种：中文

收录情况：CAB、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的研究458nt^1 308nt乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白TSR′r′对Huh7细胞基因表达的影响,探讨其可能的致病机制。方法PCR扩增TSR′r′编码序列并克隆入pcDNA3.1/HisC。以FuGENE6将重组表达载体及相应空载体分别瞬时转染Huh7细胞,Trizol抽提细胞总蛋白与总RNA;以融合表达多肽表位抗体为一抗,Western blot检测目的蛋白的表达;用Affymetrix Genechip U133 plus 2.0人类基因表达谱芯片检测Huh7肝细胞基因转录的变化,并以半定量RT-PCR进一步验证。结果成功构建重组真核表达载体pcDNA3.1/HisC-TSR′r′,转染48 h后在Huh7细胞中表达TSR′r′蛋白。TSR′r′导致Huh7细胞载脂蛋白H等27个基因转录上调,其中包括5种代谢相关基因,7种免疫相关基因,7种胶原及胞外基质基因,5种干扰素诱导蛋白基因;TSR′r′还导致Huh7细胞核受体共激活物1基因在内的7种基因转录下降。结论458nt^1 308nt乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白可能多方面影响肝细胞功能,具有重要的致病意义。

关 键 词：肝炎病毒,乙型  RNA剪接 人类基因表达谱芯片  

分 类 号：R373.21]