文献类型：期刊文章

作　　者：廖娟[1,2] 王红宁[3] 田浪[1] 张毅[3]

机构地区：[1]四川农业大学动物医学院,四川雅安625014 [2]四川省自贡市畜牧局,四川自贡643000 [3]四川大学生命科学学院动物疾病防控生物工程研究中心,四川成都610064

出　　处：《中国兽医学报》

基　　金：国家“863”计划项目(2006AA10A205)

年　　份：2009

卷　　号：29

期　　号：11

起止页码：1373-1376

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：将禽传染性支气管炎病毒(IBV)M基因克隆到毕赤巴斯?表达载体pPIC9K中,构建了重组表达载体pPIC9K-M,电击转化毕赤巴斯?酵母GS115,经MD和MM平板筛选和PCR鉴定后,采用G418抗性梯度筛选得到高拷贝重组菌株GS115/pPIC9K-M His+Mut+,重组菌株用1%的甲醇诱导分泌表达,并对表达产物进行SDS-PAGE、Western-blot分析。结果表明,IBV M基因在毕赤酵母中成功获得了表达,表达蛋白的相对分子质量约为33 000,能与IBV阳性血清特异性结合。将表达蛋白初步纯化后作为包被抗原,ELISA检测结果显示表达蛋白与特异性抗体反应良好,表明表达的M蛋白生物学活性良好。本研究表达的IBV M蛋白可作为制备IB诊断抗原的基础材料,对IB的防治有重要理论和实用价值。

关 键 词：禽传染性支气管炎病毒 M基因 毕赤酵母 分泌表达 活性检测

分 类 号：S852.65]