文献类型：期刊文章

作　　者：高鹏[1] 赵健[1] 傅文彬[1] 王富军[2] 袁勤生[1] 刘建文[1]

机构地区：[1]华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237 [2]浙江日升昌药业有限公司,浙江322100

出　　处：《食品与药品》

年　　份：2009

卷　　号：11

期　　号：5

起止页码：5-8

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSA-PROQEUST、IC、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的制备TAT-凋亡蛋白质并研究其抗肿瘤活性。方法将重组质粒pET-28b-TAT-vp3转入E.coliBL21(DE3)中表达其蛋白质,利用Ni-NTA亲和柱纯化目的蛋白质包涵体,纯化样品透析复性后研究其抗肿瘤活性。结果30℃时重组蛋白质包涵体表达量最高,尿素变性条件下用Ni-NTA亲和柱层析纯化包涵体,用500mmol/L咪唑溶液洗脱,从镍柱上解离的目标蛋白质纯度达到92%以上。MTT实验表明,纯化后蛋白质浓度10μg/mL时,HeLa细胞存活率降至42%(IC50=4.2μg/mL);动物实验表明,样品组抑瘤率可达到48.3%。结论大肠杆菌表达的TAT-凋亡蛋白质具有抗肿瘤效应。

关 键 词：TAT-凋亡蛋白  包涵体表达  制备  抗肿瘤活性

分 类 号：Q554]