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大豆花叶病毒CP基因原核表达与抗血清制备
Prokaryotic Expression of SMV CP Gene and Preparation of the Antibody Against CP
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]皖西学院化学与生命科学系,六安237012 [2]安徽省植物生物技术实训中心,六安237012
基 金:安徽省植物生物技术实训中心项目
年 份:2009
卷 号:25
期 号:10
起止页码:98-101
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:根据已报道的大豆花叶病毒(SMV)序列设计引物,扩增SMV的外壳蛋白(CP)基因,序列同源性分析结果表明,与目前已报道的SMV不同分离物CP基因核苷酸序列同源性为85.0%~96.8%,相应推测的氨基酸序列同源性为87.9%~98.9%。将CP基因插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌BL21(DE3)PlysS中诱导表达。通过12%SDS-PAGE和5%~20%梯度SDS-PAGE两次制备电泳纯化诱导产物,免疫家兔获得抗CP血清,Western blot分析对CP具有高度特异性。硫酸铵沉淀法与Protein A-Red Sepharose亲和层析相结合提取IgG,获得效价达1∶3800的一抗,可用于田间SMV病样检测。
关 键 词:大豆花叶病毒 CP基因 原核表达 抗血清制备
分 类 号:S435.651]
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