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小麦胆色素原脱氨酶的联合酶活法测定
The Porphobilinogen Deaminase Assay Used δ-Aminolevulinate as Substrate by Coupled Enzyme Assay
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]安徽农业大学生物技术研究中心 [2]西北农业大学基础部植物生化室
基 金:国家自然科学基金
年 份:1998
卷 号:25
期 号:1
起止页码:76-80
语 种:中文
收录情况:CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、PROQUEST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、普通刊
摘 要:本实验以小麦匀浆液中的δ-氨基酮戊酸脱水酶(ALAD)催化δ-氨基酮戊酸(ALA)生成胆色素原(PBG),并以PBG作为底物测定胆色素原脱氨酶(PBGD)的酶活,结果表明:将ALA缓冲液与粗ALAD酶液1∶2(v/v)混合,25℃,黑暗反应4h,可获得最大量的PBG,加入部分纯化的PBGD,37℃反应1h后,测得底物PBG减少,产物原尿卟啉原Ⅰ增加,该联合酶活测定法以PBG减少来直接确定加热处理后的凝胶过滤和亲合层析纯化的PBGD酶活高峰管,具有经济、快速、方便等优点,可用于纯化小麦叶绿素突变体返白系中胆色素原脱氨酶和尿卟啉原Ⅲ合成酶。
关 键 词:Δ-氨基酮戊酸 小麦 胆色素原脱氨酶 酶活
分 类 号:S512.101]
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