文献类型：期刊文章

作　　者：赵文秀[1,2] 尹震宇[1] 余强峰[1] 王效民[1]

机构地区：[1]厦门大学附属中山医院肝胆外科,福建省厦门市361004 [2]厦门大学消化疾病研究所,福建省厦门市361004

出　　处：《中国组织工程研究与临床康复》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30872484);福建省自然科学基金资助项目(C0610044)~~

年　　份：2009

卷　　号：13

期　　号：36

起止页码：7103-7107

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2011_2012、EMBASE、IC、核心刊

摘　　要：背景:目前肝干细胞尚无特异性标志物,故其分离、培养尤其是纯化技术尚不成熟。目的:观察体外培养的小鼠胚胎肝干细胞生物学特性,及其向肝样细胞的诱导分化能力。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-01/06在厦门大学附属中山医院消化中心实验室完成。材料:SPF级BALB/c胎鼠20只,13.5d龄,由厦门大学生命科学学院实验动物中心提供。方法:无菌操作取出胎鼠肝脏,用细胞刮梳理后用IV型胶原酶消化。取分离纯化后的第2代细胞进行免疫荧光染色。细胞培养到第3代时,分别用3mmol/L丁酸钠盐与0.1%DMSO进行诱导,5d后收集细胞进行Western blotting实验。主要观察指标:胚胎肝干细胞的形态及表面分子的表达,诱导后胚胎肝干细胞mRNA与蛋白水平的变化。结果:分离培养的细胞第2代即可得以纯化,呈克隆样生长,高表达白蛋白、甲胎蛋白、C-met及角蛋白19,且多数细胞共表达白蛋白与角蛋白19、C-met与角蛋白19,双阳性率约80%。细胞诱导后肝细胞标志物白蛋白表达明显增加,而作为不成熟肝细胞的经典标志物甲胎蛋白表达减少,同时干细胞标志物c-kitmRNA水平也明显下降,角蛋白19水平无明显变化。结论:胚胎肝干细胞具有双向分化潜能,经丁酸钠盐与DMSO诱导后可以向肝样细胞分化。

关 键 词：肝干细胞 分化 小鼠  胚胎

分 类 号：R394.2]