文献类型：期刊文章

作　　者：张敬梅[1] 余为一[1] 李林[1] 张春玲[1]

机构地区：[1]安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室,安徽合肥230036

出　　处：《安徽农业科学》

基　　金：安徽省科技攻关项目(04013042)资助

年　　份：2009

卷　　号：37

期　　号：27

起止页码：12955-12956

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、JST、RCCSE、核心刊

摘　　要：[目的]应用杂交瘤技术获得稳定分泌抗猪γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。[方法]先将原核表达产物His-PoIFN-γ免疫BALB/c小鼠4次,然后进行细胞融合,再以纯化的GST-PoIFN-γ作为包被抗原,用间接ELISA筛选阳性杂交瘤无性系,最终获得能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,对其进行间接ELISA和Western blot检测。[结果]试验获得1株能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,被命名为B3株,经间接ELISA和Western blot检测,该株分泌的抗体能与融合蛋白His-PoIFN-γ和GST-PoIFN-γ发生特异性反应,而与其他表达鸡γ-干扰素、His和GST蛋白等的重组质粒均不发生反应。B3株分泌的抗体小鼠腹水的ELISA效价达到1∶160 000,抗体亚型为IgG1型,且轻链为κ链。[结论]该研究为建立猪γ-干扰素检测方法,研究机体的免疫状态及免疫机制提供了技术基础。

关 键 词：猪Γ-干扰素 融合蛋白 单克隆抗体 制备  鉴定  

分 类 号：S852]