文献类型：期刊文章

作　　者：魏伟[1] 王正党[1] 冉多亮[1] 黄嘉驷[1] 孟颖[1] 秋阳[1] 叶志远[1] 魏文进[1]

机构地区：[1]新疆军区后勤部卫生防疫大队

出　　处：《中国兽医学报》

基　　金：新疆维吾尔自治区科委资助

年　　份：1998

卷　　号：18

期　　号：5

起止页码：457-459

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX1996、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：在ＢＨＫ２１细胞中增殖伪狂犬病病毒（ＰＲＶ），提纯ＰＲＶＤＮＡ，选编码特异性糖蛋白ｇｐ５０基因中的２６２ｂｐ片段进行ＰＣＲ扩增。扩增产物经ＫｐｎⅠ和ＳａｌⅠ双酶切后，将２２２ｂｐ片段与质粒ｐＵＣ１９连接构成重组子ｐＵＰ。通过转化大肠杆菌ＪＭ８３、Ａｍｐｒ和α互补效应筛选后，扩增、提纯重组子ｐＵＰ，用ＫｐｎⅠ和ＳａｌⅠ酶切，电泳回收克隆的２２２ｂｐ片段。用光敏生物素标记２２２ｂｐ片段和重组子ｐＵＰ制备的探针，分别检出４６．８ｐｇ和９３．６ｐｇ的ＰＲＶＤＮＡ，且ｐＵＰ探针只与ＰＲＶ呈杂交阳性反应，与ＨＳＶ－１、ＨＳＶ－２及ＣＭＶ呈阴性反应。

关 键 词：伪狂犬病病毒 gp50基因  无性系 光敏生物素 探针  

分 类 号：S852.65] Q78[动物医学类]