文献类型：期刊文章

作　　者：张莉[1] 屈艺[1] 张筱岚[1] 杨春蕾[2] 毛萌[1] 母得志[1]

机构地区：[1]四川大学华西第二医院儿科,成都610041 [2]四川大学生命科学学院医学细胞生物学教研室

出　　处：《中国修复重建外科杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30825039;30770748;30570623);四川大学华西医学中心CMB项目资助(00-722);教育部留学回国人员启动基金资助项目(2006331-11-7);四川省青年科技基金项目(08ZQ026-069)~~

年　　份：2009

卷　　号：23

期　　号：8

起止页码：954-958

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor1α,HIF-1α)及细胞外调节蛋白激酶1/2(extra-cellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2)在体外培养的胎鼠大脑皮质神经元缺氧缺血再灌注后变化的趋势及其相互关系。方法取15只16～18d孕龄SD大鼠的大脑皮层,进行皮质神经元原代培养,取培养5d的原代神经元建立氧糖剥离(oxygen and glucose deprivation,OGD)模型。实验分为实验组1:OGD模型制备后,更换培养液为含葡萄糖的神经元完全培养基,以形成再灌注;取再灌注0、2、4、8、12、24h观察;对照组1:正常培养液孵育的神经元;实验组2:U0126预处理神经元后制备OGD模型,于再灌注后4、8h观察;对照组2:DMSO预处理神经元后制备OGD模型,余同实验组2。应用Westernblot定量测定各组HIF-1α、VEGF蛋白及ERK1/2、p-ERK1/2的表达变化,SABC免疫细胞化学法检测p-ERK1/2、HIF-1α蛋白表达及分布情况。结果培养5d的皮质神经元突起间互相连接成网状。实验组1HIF-1α、VEGF蛋白表达逐渐升高,8h表达量最高,12h后逐渐下降,与对照组1比较差异有统计学意义(P<0.05)。各时间点实验组1与对照组1ERK1/2蛋白表达无明显差异(P>0.05)。实验组1p-ERK1/2蛋白表达在2h时开始增加,4h达高峰,8h开始下降,与对照组1比较差异有统计学意义(P<0.01);实验组2p-ERK1/2蛋白表达下降,HIF-1α及VEGF蛋白表达也随之下调,与对照组2比较差异均有统计学意义(P<0.05)。各时间点实验组2和对照组2ERK1/2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。免疫细胞化学染色显示神经元黄棕色着色减弱,p-ERK1/2、HIF-1α表达下降。结论HIF-1α及其靶基因VEGF蛋白在OGD再灌注后的皮质神经元表达具有一定时间规律性,抑制ERK1/2信号通路后这两个蛋白表达均下降,提示该通路在神经元OGD后诱导HIF-1α及VEGF的调控中起重要作用。

关 键 词：神经元 缺氧缺血  缺氧诱导因子1Α 细胞外调节蛋白激酶 胎鼠

分 类 号：R363]