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双向电泳结合质谱初步分析蛇岛蝮蛇毒蛋白质组
Proteomic Analysis of Gloydius shedaoensis shedaoensis Venom by Two-dimensional Electrophoresis Combined to High Performance Liquid Chromatography-electro-spray Ionization Tandem Mass Spectrometry:a Preliminary Study
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]大连医科大学临床医学系,大连116044 [2]大连医科大学生化与分子生物学教研室,大连116044 [3]大连医科大学基础医学院生物技术系,大连116044 [4]辽宁蛇岛老铁山自然保护区管理处,大连116041 [5]觊斯西保留地大学医学院,美国克利夫兰44106
基 金:大连医科大学大学生科研活动资助项目;辽宁省自然科学基金项目(No.2008S077);大连科技厅资助项目(No.2008J22JH014);辽宁省百千万人才工程资助项目(No.2008921069)
年 份:2009
卷 号:44
期 号:4
起止页码:70-77
语 种:中文
收录情况:AJ、BDHX、BDHX2008、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊
摘 要:采用荧光染料(Cy5)标记中国辽宁蛇岛蝮(Gloydius shedaoensis shedaoensis,GSS)蛇毒(snake venom,SV,GSS-SV)蛋白质,获得了该蛇毒的双向十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D SDS-PAGE)图谱,经DeCyder软件分析,分辨出1000多个蛋白点,分子量范围在10~150ku间,等电点在4~7的蛋白质点占78.8%。凝胶后染色(post-staining)采用蛋白荧光染料Deep Purple,选取的5个蛋白点经胶内酶解,产生的肽段经高效液相色谱-电喷雾串联质谱(high performance liquid chromatography/HPLC-electro-spray ionization tandem mass spectrometry/ESI-MS/MS,HPLC-ESI-MS/MS)进行序列测定,质谱数据经Sequest Bioworks软件分析,为蛇毒L-氨基酸氧化酶、金属蛋白酶、类凝血酶、纤溶酶原激活物和磷脂酶A2的同源蛋白。本研究采用的荧光标记2DSDS-PAGE结合HPLC-ESI-MS/MS的技术适于高通量研究蛇毒蛋白组成。
关 键 词:蛇岛蝮 蛇毒 双向电泳 高效液相色谱 电喷雾质谱
分 类 号:Q51] O629.13]
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