文献类型：期刊文章

作　　者：那宏坤[1] 黄清育[1] 黄河清[1,2,3]

机构地区：[1]厦门大学生命科学学院生物化学与生物技术学系,厦门361005 [2]近海海洋环境科学国家重点实验室,厦门361005 [3]化学化工学院固体表面物理化学国家重点实验室和化学生物学福建省重点实验室,厦门361005

出　　处：《分析化学》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.40776060);福建省高校创新研究团队基金资助

年　　份：2009

卷　　号：37

期　　号：7

起止页码：1019-1024

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EI、IC、JST、RCCSE、RSC、SCI(收录号：WOS:000268522400016)、SCI-EXPANDED(收录号：WOS:000268522400016)、SCIE、SCOPUS、UPD、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：人工构建镉盐污染源,选用差速离心结合双向凝胶电泳(2D-PAGE)法,高效提取、分离和筛选牙鲆(Paralichthys olivaceus,PO)受镉盐胁迫后的肝脏全蛋白和差异蛋白质。实验结果表明:选用直接裂解法提取牙鲆肝(PO liver POL)全蛋白质且用2D-PAGE分离,可获得约800个蛋白斑点,其中镉盐诱导了11个差异蛋白斑点。以相对离心力为1000×g、12000×g和100000×g的差速离心法,分别制备了3种沉淀蛋白和1种胞浆蛋白,称为POL组分Ⅰ、POL组分Ⅱ、POL组分Ⅲ和POL组分Ⅳ(胞浆蛋白),蛋白斑点数目分别为380、550、500和850个,总计2280个,明显高于直接裂解法。比较分析法发现,差速离心结合2D-PAGE分离技术可获得牙鲆肝脏受镉盐胁迫后表达的54个差异蛋白质,并适合于用肽质量指纹(peptide mass fingerprint,PMF)图谱技术鉴定。本实验所建立的差速离心结合蛋白质组学技术可高效提取、分离和鉴定组织全蛋白或差异蛋白,并能有效地筛选出蛋白指示物。

关 键 词：牙鲆肝  蛋白质组学  差速离心  镉污染 蛋白指示物  

分 类 号：S917.4[水产类]