文献类型：期刊文章

作　　者：刘艳艳[1] 梁淑娟[1] 王焕芹[1] 张素华[1] 肖伟玲[1] 吴慧娜[1]

机构地区：[1]潍坊医学院免疫学教研室,山东省高校免疫学重点实验室,山东潍坊261042

出　　处：《中国肿瘤生物治疗杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.30772497);山东省高层次卫生人才1020工程专项基金;教育部科学技术研究基金重点项目(No.205090);山东省科技攻关计划项目(No.2008GG10002007)~~

年　　份：2009

卷　　号：16

期　　号：3

起止页码：253-257

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2011_2012、DOAJ、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:构建肝癌细胞特异性小鼠IL-1β反义RNA表达载体,观察其对H22肝癌细胞小鼠移植瘤生长的影响及其相关机制。方法:构建由AFP最小启动子和CMV增强子嵌合序列调控的携IL-1β反义RNA表达载体pafpIRES2-antiIL-1β1和pafpIRES2-antiIL-1β2,经质粒PCR、限制性酶谱分析、序列测定进行鉴定。反义RNA表达载体转染小鼠H22肝癌细胞,分H22/mock组、H22/antiIL-1β1组、H22/antiIL-1β2三组,RT-PCR检测IL-1β的表达水平。以转染后的H22细胞皮下接种建立荷肝癌小鼠模型,观察移植瘤体积和重量,MTT法检测荷瘤小鼠脾脏中分离的NK细胞对H22细胞的杀伤活性。结果:经质粒PCR、限制性酶谱分析、序列测定证实成功构建能够在肝癌细胞中特异性表达IL-1β反义RNA的表达载体pafpIRES2-anti-IL-1β1和pafpIRES2-antiIL-1β2,转染H22细胞后细胞中IL-1β表达水平明显下降,以pafpIRES2-antiIL-1β2更为显著。成功建立荷肝癌小鼠模型,与H22/mock组小鼠相比,H22/antiIL-1β2组小鼠移植瘤体积较小,生长显著减慢(P<0.05)。H22/anti-IL-1β1、H22/antiIL-1β2组荷瘤小鼠的NK细胞对H22细胞的杀伤活性明显增强(P<0.05或P<0.01)。结论:成功构建的肝癌细胞特异性IL-1β反义RNA表达载体可有效抑制小鼠移植肝癌的生长,其机制与靶向阻断IL-1β表达、上调NK细胞的杀伤活性有关。

关 键 词：肝癌 白细胞介素1Β 反义RNA NK细胞

分 类 号：R735.7] R735.54[临床医学类]