文献类型：期刊文章

作　　者：王杰[1] 戴佳琳[2] 黄江[2] 吴璇[2] 廖兴江[2] 申萍香[2] 周灵贵[2] 杜武英[2] 郎书源[2]

机构地区：[1]贵阳医学院法医教研室,贵阳550004 [2]贵阳医学院多媒体形态学实验室

出　　处：《中国公共卫生》

基　　金：国家自然科学基金(30760227);贵州省科技攻关项目[黔科合NY字(2008)3060]

年　　份：2009

卷　　号：25

期　　号：7

起止页码：827-828

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的扩增、克隆和表达亚洲牛带绦虫(Taenia saginata asiatica)Spef1-Like基因全长cDNA,并进行表达产物的纯化。方法以亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中含Spef1-Like基因的质粒作为模板,扩增该基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,测序鉴定重组质粒,在大肠埃希菌BL-21/DE3中用异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化。结果PCR,双酶切及DNA测序见过均表明重组质粒pET-28a(+)-Spef1-Like构建成功,该基因在大肠埃希菌中以上清表达,纯化后蛋白通过SDS-PAGE鉴定结果表明该基因在大肠埃希菌BL-21/DE3得到高效表达。结论成功克隆了亚洲牛带绦虫Spef1-Like基因,并表达和纯化了Spef1-Like蛋白,为研究Spef1-Like的功能及其疫苗等研究提供了基础依据。

关 键 词：亚洲牛带绦虫 Spef1-Like基因  基因克隆 原核表达

分 类 号：R383.32]