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期刊文章详细信息

猪细小病毒SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测方法的建立    

Development of SYBR Green Ⅰ real-time PCR assay for detection of porcine parvovirus

  

文献类型:期刊文章

作  者:李明凤[1,2] 魏战勇[1] 王学斌[2] 张红英[1] 王亚宾[1] 崔保安[2]

机构地区:[1]河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002 [2]河南省动物性食品安全重点实验室,河南郑州450002

出  处:《浙江农业学报》

基  金:河南省杰出人才创新基金项目(0621002100)

年  份:2009

卷  号:21

期  号:3

起止页码:220-224

语  种:中文

收录情况:BDHX、BDHX2008、CAB、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘  要:利用PCR技术扩增出猪细小病毒VP2保守区基因194 bp片段,并克隆到pGEMT载体上,纯化质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为标准模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了猪细小病毒的荧光定量PCR检测方法。该方法检测灵敏度可达1.0×102拷贝/μL,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒、猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒和猪流感病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;对10份疑似病料和阴性病料进行了检测,发现10份均为荧光定量PCR阳性,而常规PCR只能检测出7份阳性。结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床猪细小病毒(PPV)的检测。

关 键 词:猪细小病毒 实时定量PCR 标准曲线  

分 类 号:S858.28] S852.65[动物医学类]

参考文献:

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二级参考文献:

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耦合文献:

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引证文献:

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同被引文献:

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