期刊文章详细信息
猪细小病毒SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测方法的建立
Development of SYBR Green Ⅰ real-time PCR assay for detection of porcine parvovirus
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002 [2]河南省动物性食品安全重点实验室,河南郑州450002
基 金:河南省杰出人才创新基金项目(0621002100)
年 份:2009
卷 号:21
期 号:3
起止页码:220-224
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2008、CAB、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:利用PCR技术扩增出猪细小病毒VP2保守区基因194 bp片段,并克隆到pGEMT载体上,纯化质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为标准模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了猪细小病毒的荧光定量PCR检测方法。该方法检测灵敏度可达1.0×102拷贝/μL,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒、猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒和猪流感病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;对10份疑似病料和阴性病料进行了检测,发现10份均为荧光定量PCR阳性,而常规PCR只能检测出7份阳性。结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床猪细小病毒(PPV)的检测。
关 键 词:猪细小病毒 实时定量PCR 标准曲线
分 类 号:S858.28] S852.65[动物医学类]
参考文献:
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引证文献:
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同被引文献:
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