文献类型：期刊文章

作　　者：李真真[1] 韩跃武[1] 刘玲玲[1] 韩亚萍[1] 路艳[1] 王春霞[1]

机构地区：[1]兰州大学基础医学院医学生物化学与分子生物学研究所,甘肃兰州730000

出　　处：《生物技术》

基　　金：国家"863"计划重大项目子课题(2006AA10A208-1-4);甘肃省科技攻关项目(2GS064-A43-020-21)资助

年　　份：2009

卷　　号：19

期　　号：3

起止页码：42-46

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、核心刊

摘　　要：目的:建立SELEX技术筛选胃癌细胞SGC-7901适配子的方法,并初步鉴定获得的SGC-7901细胞适配子。方法:体外合成全长88bp中间含52bp随机序列的ssDNA文库,通过优化PCR扩增条件,利用地高辛-抗地高辛抗体-碱性磷酸酶系统测定亲和力,经SELEX反复筛选获得胃癌SGC-7901细胞的特异性适配子。将最后一轮筛选产物克隆、测序并用相关软件分析适配子序列的一级结构和二级结构。结果:经12轮SELEX筛选,ssDNA文库与SGC-7901细胞的亲和力由0.16上升至1.14,表明特异性适配子得到逐步富集。22个克隆子测序,有4个序列完全一致,二级结构预测茎环可能是适配子与胃癌细胞作用的结构基础。结论:成功建立了SELEX技术体外筛选胃癌细胞SGC-7901高亲和性适配子的方法。

关 键 词：胃癌细胞 SELEX 适配子 随机ssDNA文库  

分 类 号：R735.2] Q789[临床医学类]