文献类型：期刊文章

作　　者：王彦[1] 范开[2] 夏永鹏[3] 张继兰[2] 梅翔[2] 陈海容[2] 李秀梅[4] 邱宗荫[1]

机构地区：[1]重庆医科大学药学院,重庆400042 [2]重庆理工大学化学与生物工程学院制药工程系,重庆400050 [3]重庆市卫生局,重庆400042 [4]重庆市药品检验所生化与生物制品室,重庆401121

出　　处：《第三军医大学学报》

年　　份：2009

卷　　号：31

期　　号：12

起止页码：1181-1184

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的研究重组人睫状神经因子(rh-CNTF)的表达、纯化及聚乙二醇化修饰、纯化方法。方法重组人睫状神经因子(rh-CNTF)工程菌经37℃培养至对数生长期,加入IPTG诱导4h,经QSepharose F.F凝胶柱纯化和复性后得到纯化的rh-CNTF。以体外培养鸡胚背根神经节(DRG)方法测定重组蛋白rh-CNTF的神经营养活性。用单甲氧基聚乙二醇丁醛(mPEG-ButyrALD-20k)对rh-CNTF进行修饰,所得修饰产物经DEAESepharose F.F和Superdex 75凝胶分离纯化后获得mPEG-rh-CNTF偶联物。结果目的蛋白占总蛋白30%左右,为包涵体,经QSepharose F.F凝胶柱纯化和复性,获得纯度达90%的rh-CNTF。表达的rh-CNTF能促进培养的鸡胚背根神经节神经突起的生长。修饰后的单聚PEG-rhCNTF经DEAESepharose F.F和Superdex 75凝胶纯化后纯度达到95%。结论确立了rh-CNTF蛋白表达纯化及PEG修饰的方法。

关 键 词：重组人睫状神经因子  表达  纯化 聚乙二醇修饰

分 类 号：R914.5] R977.6[药学类]