文献类型：期刊文章

作　　者：赵莹[1,2] 孙哲[1] 刘燕[3] 胡后银[4] 陈大芳[5] 娄玉杰[2] 张宏福[1]

机构地区：[1]中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室,北京100193 [2]吉林农业大学动物科技学院,长春130118 [3]内蒙古农业大学动物科技学院,呼和浩特010018 [4]济南市畜牧兽医研究所,济南250002 [5]贵州省畜禽良种场,贵阳550018

出　　处：《畜牧兽医学报》

基　　金：国家自然科学基金项目(30500364);中国博士后基金项目(20060390897)

年　　份：2009

卷　　号：40

期　　号：5

起止页码：670-675

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2011_2012、DOAJ、EMBASE、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：以SmaI和SphI双酶切pMD18-T-CBHⅡ和以胸苷酸合成酶基因(thymidylate synthase,thyA)为选择压力的非抗生素抗性的穿梭表达载体pW425t,胶回收酸性纤维素酶CBHⅡ基因和载体大片段,并将纯化的CBHⅡ基因和表达载体pW425t大片段进行连接,构建出可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的原核表达重组质粒pW425t-CBHⅡ。将pW425t-CBHⅡ转化至thyA基因缺陷型的乳酸杆菌感受态细胞中,通过质粒提取、酶切鉴定、PCR鉴定、测序分析和生长功能弥补筛选阳性克隆。SDS-PAGE分析,可见约49.6 ku的蛋白,并且刚果红染色显示重组乳酸杆菌可产生明显的水解圈。

关 键 词：纤维素酶 CBHⅡ基因  乳酸杆菌 表达  

分 类 号：Q784] Q786