文献类型：期刊文章

作　　者：成鹰[1] 杜丽[1] 王凤阳[1] 刘涛[1] 李治深[1] 许世英[2] 符运南[2] 林贤梅[2] 吴科榜[1] 林杰材[1] 满初日嘎[1]

机构地区：[1]海南大学农学院,海口市动物基因工程重点实验室,海口570228 [2]海南大田国家级自然保护区,东方572600

出　　处：《兽类学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30560021);海南省自然科学基金资助项目(30509);海南省教育厅高校科研资助项目(Hj200609)

年　　份：2009

卷　　号：29

期　　号：2

起止页码：191-197

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、GEOBASE、IC、JST、PUBMED、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：采用RT-PCR和RACE方法扩增海南坡鹿热休克转录调节因子1(Heat shock transcription factor1,HSF1)cDNA全长,将扩增产物与pMD20-T载体连接,重组质粒经PCR、酶切鉴定后测序并进行生物信息学分析;构建pET28a-hdHSF1表达载体,经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示,海南坡鹿HSF1cDNA全长为2036bp,含有1个1578bp的开放阅读框,编码525个氨基酸。经生物信息学分析,HSF1是一个等电点为4.93的亲水性蛋白。经IPTG诱导表达后,得到一个带组氨酸标签的约62kD的融合蛋白,用抗His单克隆抗体进行Western blot,得到一条约62kD特异性抗体结合带,表明海南坡鹿HSF1原核表达载体成功构建并表达。

关 键 词：海南坡鹿 HSF1  克隆 表达  

分 类 号：Q786]