文献类型：期刊文章

作　　者：黄湘[1] 谭家余[1] 邱玉林[1] 梁文军[1] 周铭[1] 李明[2]

机构地区：[1]嘉应学院医学院基础部病原教研室,广东梅州514031 [2]南方医科大学生物技术学院,广东广州510515

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》

基　　金：国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2006AA02A311)

年　　份：2009

卷　　号：25

期　　号：5

起止页码：402-405

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:构建pDsRed1-C3/LOC51255真核表达质粒并检测其在人肝癌细胞株HePG2中的表达和亚细胞定位。方法:采用PCR法从pET28b/LOC51255重组质粒中克隆得到LOC51255cDNA全长序列,并将该片段亚克隆到真核表达载体pDsRed1-C3中。构建好的pDsRed1-C3/LOC51255真核表达质粒经双酶切和测序鉴定后,采用脂质体法将该重组质粒转染人肝癌细胞株HePG2,再用荧光显微镜直接观察LOC51255在其中的表达及定位情况。结果:经双酶切及DNA测序结果证实成功构建重组质粒pDsRed1-C3/LOC51255;荧光显微镜观察证实该重组质粒能在HePG2细胞中表达,且LOC51255蛋白主要定位于HePG2细胞的细胞质。结论:成功构建pDsRed1-C3/LOC51255真核表达质粒,并在HePG2细胞中得到表达,同时证实LOC51255定位于HePG2细胞的胞质,为进一步研究人类LOC51255基因的功能奠定了基础。

关 键 词：真核表达质粒 HePG_2  LOC51255  构建  表达  亚细胞定位

分 类 号：R392.12]