文献类型：期刊文章

作　　者：井莹莹[1] 杨吉成[1] 缪竞诚[1] 盛伟华[1] 胡志清[1] 郁心[2] 单云波[1] 刘铁连[1] 韩亚丽[1] 包婉蓉[1] 张日[3] 朱南康[4]

机构地区：[1]苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室,苏州215123 [2]无锡中心血站,无锡214021 [3]苏州大学附属第一医院血液科,苏州215006 [4]苏州大学放射医学研究所,苏州215007

出　　处：《中国免疫学杂志》

基　　金：国防科工委基础科研计划(K0102061501)资助

年　　份：2009

卷　　号：25

期　　号：5

起止页码：434-438

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:建立转hLIF基因腺病毒载体的饲养层细胞,观察对CD34+造血干/祖细胞的扩增作用,并研究移植辐射损伤模型SCID小鼠的效果。方法:建立转hLIF基因腺病毒载体的饲养层细胞,并用RT-PCR法鉴定目的基因;采用免疫磁珠法分离脐带血CD34+造血干/祖细胞,流式细胞术检测纯度;将CD34+造血干/祖细胞与饲养层细胞共培养,流式细胞术检测各组增殖效果,建立辐射损伤模型SCID小鼠,将扩增后的CD34+造血干/祖细胞经CFDASE荧光标记后移植入SCID小鼠体内,通过RT-PCR和观察荧光标记细胞来检测小鼠内的人源细胞。结果:建立的转基因饲养层细胞均有绿色荧光,RT-PCR法证实有目的基因表达,免疫磁珠法分离的CD34+造血干/祖细胞纯度可达(95.6±2.58)%,与饲养层细胞共培养后CD34+造血干/祖细胞可扩增13.2倍,表面粘附分子CXCR4和CD54表达量仍较高,移植入SCID小鼠四周后,仍可见带有荧光标记的人源细胞,RT-PCR证明人源基因Alu的存在。结论:建立的转hLIF基因腺病毒载体饲养层细胞可以有效地扩增CD34+造血干/祖细胞,延缓其分化,并且有较高的移植效率和造血活性。

关 键 词：hLIF  腺病毒载体 造血干/祖细胞  SCID小鼠

分 类 号：R392.12]