文献类型：期刊文章

作　　者：魏锁成[1] 何丽[1]

机构地区：[1]西北民族大学动物医学研究所,甘肃兰州730030

出　　处：《中国动物检疫》

基　　金：国家民委2002年度重点资助项目(MW2002-ZD-010);甘肃省2007年度科技支撑项目(编号0708NKCA079)

年　　份：2009

卷　　号：26

期　　号：5

起止页码：38-41

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、RCCSE、普通刊

摘　　要：目的:建立轮状病毒快速准确的检测方法,为研发诊断试剂盒和疫苗奠定基础。方法:用Primer5软件设计VP7引物,从采集的腹泻犬粪便样品抽提病毒RNA,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,将RNA反转录为cDNA,并进行PCR扩增,对扩增产物进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和测序,与代表株的VP7进行同源性比较。结果:从腹泻病犬粪便样品中抽提到了轮状病毒RNA,反转录后扩增产物为51bp的基因片段,经核苷酸序列分析,其PCR序列与犬轮状病毒VP7基因编码源序列的同源性为86.3%。结论:正确克隆了轮状病毒主要保护性抗VP7基因中抗原表位区,建立了犬轮状病毒实时定量诊断方法,为研制实时定量诊断试剂盒奠定了基础。

关 键 词：轮状病毒 VP7 RT-PCR 实时荧光定量PCR

分 类 号：S852.655]