文献类型：期刊文章

作　　者：李永仙[1,2] 谢焱[1,2] 朱林江[2] 张一心[2] 顾国贤[2] 李崎[1,2]

机构地区：[1]江南大学工业生物技术教育部重点实验室,无锡214122 [2]江南大学生物工程学院酿酒科学与工程研究室,无锡214122

出　　处：《生物工程学报》

基　　金：国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2006AA020204);国家科技支撑计划(Nos.2007BAK36B01;2008BAI63B06)资助~~

年　　份：2009

卷　　号：25

期　　号：4

起止页码：542-548

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为了比较不同的表达系统对β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因(bgl)的效果,本研究将高产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的淀粉液化芽孢杆菌Bacillus amylolique faciens BS5582的bgl基因(GenBank Accession No.EU623974)克隆到3种不同的质粒载体中,即构建pEGX-4T-1-bgl、pET20b(+)-bgl和pET28a(+)-bgl重组质粒。比较了pEGX-4T-1-bgl在不同Escherichiacoli宿主中表达效果,以及pET20b(+)-bgl和pET28a(+)-bgl在E.coliBL21(DE3)中的表达效果。结果表明,E.coliBL21(DE3)-pET28a(+)-bgl能够表达最高的重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶活,其总酶活可达(322.0±8.8)U/mL,是出发菌在最适摇瓶发酵条件下产酶活的40.1%。对该重组菌的产酶条件进行了分析,结合IPTG和乳糖协同的诱导作用,在基础产酶培养基中产最高总酶活为(1883.3±45.8)U/mL,表明其具有良好的工业应用价值。

关 键 词：淀粉液化芽孢杆菌  “β-1,3-1,4-葡聚糖酶”  克隆表达 大肠杆菌

分 类 号：Q78]