文献类型：期刊文章

作　　者：韩烨[1] 周志江[1] 王培培[1] 张丽霞[1]

机构地区：[1]天津大学农业与生物工程学院食品科学系,天津300072

出　　处：《华北农学报》

基　　金：国家自然科学基金项目(30507138)

年　　份：2009

卷　　号：24

期　　号：2

起止页码：32-35

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：从乳酸片球菌中提取质粒DNA作为模板,根据GeneBank公布的细菌素结构基因,设计一对特异性引物,进行PCR扩增片段,将该片段定向克隆到pTA2载体,测序,与发表的基因序列比较,同源性为100%,然后克隆到表达载体Pet-28a,转化到Escherichia coli DH5α,经过卡那霉素平皿筛选,质粒酶切,PCR两步验证,获得阳性重组质粒,并转化表达宿主菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,Tricine-SDS-PAGE电泳,显示在4 600 Da处出现条带,与已报道的细菌素分子量大小符合。表达产物对单核细胞增多症李氏杆菌有抗菌作用。

关 键 词：乳酸片球菌 PCR 克隆 原核表达

分 类 号：Q78] TS251.92]