文献类型：期刊文章

作　　者：马艳[1] 朱家勇[1] 金小宝[1] 彭海英[1] 王艳[1]

机构地区：[1]广东药学院基础学院病原生物学研究所,广州510006

出　　处：《生物医学工程学杂志》

基　　金：广东省自然基金面上重点项目资助(04105449)

年　　份：2009

卷　　号：26

期　　号：2

起止页码：379-384

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EI、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：将BPI23-haFGF融合基因克隆到酵母表达载体pPICZαA中,构建出含BPI23-haFGF融合基因的重组质粒pPICZαA-BPI23-haFGF。通过电击将经SacⅠ酶切线性化的pPICZαA-BPI23-haFGF质粒转化到巴斯德毕赤酵母X-33菌中,并通过抗性与表型筛选、PCR鉴定获得高效的工程菌。收集表达上清进行SDS-PAGE和Western blot分析,结果表明,在43KD有与预期大小相符的条带,占上清总蛋白的50%以上。亲和层析纯化后的融合蛋白BPI23-haFGF纯度约90%,体外活性实验结果,纯化产物具有杀死革兰氏阴性菌及促进NIH3T3细胞增殖的双重功能。

关 键 词：BPI23-haFGF融合基因  毕赤酵母X-33  分泌表达 活性鉴定

分 类 号：Q786]