文献类型：期刊文章

作　　者：吴思荣[1] 惠国桢[2] 李向东[2] 王之敏[3] 胡锦[4] 祁震宇[1] 俞文华[5] 王清[6]

机构地区：[1]苏州大学附属第一医院急救中心,江苏省苏州215006 [2]苏州大学附属第一医院神经外科,江苏省苏州215006 [3]上海交通大学医学院苏州九龙医院神经外科 [4]上海市第六人民医院神经外科 [5]杭州市第一人民医院神经外科 [6]无锡市第二人民医院神经外科

出　　处：《中华急诊医学杂志》

基　　金：基金项目：国家自然科学基金资助项目（30200335）

年　　份：2009

卷　　号：18

期　　号：4

起止页码：361-366

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2011_2012、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨创伤性脑损伤（TBI）后神经细胞凋亡的变化规律及其与caspase-3基因表达的关系。方法成年健康封闭群sD大鼠120只，随机分为对照组8只、损伤组和抑制物组各56只。Feeney法致伤，抑制物组伤后脑内注射5／agcaspase-3抑制剂z—DEVD—fmk。分别在伤后1，6，24，48h和3，7，14d处死取材（每个分析时相点8只大鼠），采集伤灶中心皮质、皮层下白质、海马、齿状回，以及对侧相应部位脑组织，应用原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸（dUrP）标记法（TUNEL法）和流式细胞术检测神经细胞凋亡的变化；免疫组化法、蛋白印迹（westernblot）和半定量逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR），检测caspase-3蛋白和mRNA的表达；并借助荧光分析试剂盒检测caspase-3活性的变化。所得数据采用SPSS10．1统计软件包进行Spearman等级相关分析和方差分析（SNK-q检验）。结果伤后伤侧各脑区神经细胞凋亡指数（AI）和细胞凋亡百分率（AP）迅速增高，24～48h达峰值，随后逐渐下降，但伤后14d仍高于正常（P〈0．01）。伤后caspase-3蛋白和mRNA的表达明显增加，caspase-3活性迅速上升，峰值在24～48h。其中伤后24h伤侧海马区caspase-3蛋白谱密度与对照组相比增加1484％，caspase-3mRNA的表达量增加1043％，caspase-3活性增加148％；伤后48h伤灶皮层下白质caspase．3蛋白谱密度增加1690％，caspase-3mRNA的表达量增加1181％，caspase-3活性增加183％。Westernblot显示，伤后caspase-3原酶及p17活性亚单位的表达均增强。抑制物组caspase-3蛋白和mRNA的表达均明显下降，caspase-3活性明显降低；同时，AI值和AP值也明显降低。统计学相关分析发现，伤后神经细胞凋亡与caspase-3mRNA和蛋白的表达间呈正相关（r=0．821和r=0．638，P〈0．01），伤后caspase-3在mRNA和蛋白水平的表达间呈正相关（r=0．945，P〈0．01）。结论�

关 键 词：脑损伤 神经细胞 凋亡 CASPASE-3 z—DEVD—fmk  

分 类 号：R651.15]